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小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗体(snRNP/Sm)ELISA试剂盒西格玛代理

简要描述:

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更新时间:2019-08-22 17:23:29

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注意:本公司所销售 小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗体(snRNP/Sm)ELISA试剂盒西格玛代理 ,仅用于科研实验,不可用于食品或者临床,食用药品等等

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ELISA 试剂盒操作注意事项

1.   试剂盒保存在 2-8 ,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.   实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3.   标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白;预处理后的样本无需稀释,直接取 10 μ L 加样即可。

4.   严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.   所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂的准备

 20 × 洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1 20 稀释,即 1 份的 20 × 洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

洗板方法

1.   手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板 5 次。

2.   自动洗板机:每孔注入洗液 350 μ L ,浸泡 1min ,洗板 5 次。

操作步骤

1.   从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4

2.   设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50 μ L

3.   待测样本孔先加待测样本 10 μ L ,再加样本稀释液 40 μ L

4.   随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶( HRP )标记的检测抗体 100 μ L ,用封板膜封住反应孔, 37 水浴锅或恒温箱温育 60min

5.   弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min ,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板)。

6.   每孔加入底物 A B 50 μ L 37 避光孵育 15min

7.   每孔加入终止液 50 μ L 15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。

结果判断

  绘制标准曲线:在 Excel 工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应 OD 值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

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