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小鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA试剂盒说明书

简要描述:

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更新时间:2019-08-22 17:23:29

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ELISA 试剂盒使用手册

1.  用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。

2.  每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及 2N H2SO4 。测量时先用此孔调 OD 值至零。

3.  为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。

4.  未使用完的酶标板或者试剂,请于 2-8 保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。

5.  建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。

洗板方法

手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少 0.3ml 注入孔内,浸泡 1-2 分钟。根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

计算

以标准物的浓度为横坐标(对数坐标), OD 值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

注意事项

1.  当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。

2.  洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。

3.  一次加样时间 zui好控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.  请每次测定的同时做标准曲线, zui好做复孔。

5.  如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。

6.  在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。

7.  底物请避光保存。

8.  不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。

 

联系方式
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