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德国PAN 胎牛血清的保存要点

  • 发布日期:2018/6/7 9:12:17      浏览次数:491
    •   德国PAN 胎牛血清的保存要点
        德国PAN 胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。德国PAN 胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,德国PAN 胎牛血清是品质高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。德国PAN 胎牛血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。德国PAN 胎牛血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
        德国PAN 胎牛血清的保存:
        (1)需要长期保存的德国PAN 胎牛血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
        (2)热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中须规则摇晃均匀。此热处理的目的是使德国PAN 胎牛血清中的补体成分灭活。除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。
        (3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。
        (4)一般厂商提供的德国PAN 胎牛血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。
        (5)血清中的沉淀物絮状物:主要是德国PAN 胎牛血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理。显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。
        (6)切勿将德国PAN 胎牛血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时德国PAN 胎牛血清中的有效成分会破会而影响血清质量保存/运输:-5°C~-20°C。

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