兔子可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒说明书

 

 

  注意：本公司所销售试剂， 兔子可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒说明书 仅用于科研实验，不可用于食品或者临床，食用药品等等。

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ELISA 试剂盒所需要样本处理及要求： :

1. 血清：室温血液自然凝固 10-20 分钟，离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。

2. 血浆：应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20 分钟后，离心 20 分钟左右  （ 2000-3000 转 / 分）去除颗粒。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用 PBS （ PH7.2-7.4 ）稀释细胞悬液，细胞浓度达到 100 万 /ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清   。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的 PBS ， PH7.4 。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2-8 ℃ 的温度。加入一定量的 PBS （ PH7.4 ），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于 -20 ℃ 保存，但应避免反复冻融 .

7. 不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（ HRP ）活性。

Elisa 试剂盒使用注意事项：

1. Elisa 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2 ．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3 ．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间 zui 好 控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4 ．请每次测定的同时做标准曲线， zui 好 做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于标准品孔第一孔 OD 值的），请先用样品稀释液稀释一定倍数（ n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（ × n × 5 ）。

5 ．严格按说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准 .

6 ．本试剂不同批号组分不得混用。

7 ．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

8 ．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9 ．底物请避光保存。

Elisa 试剂盒安全性：

1 ． 避免直接接触终止液和底物。如不小心接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2 ． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3 ． 不要用嘴接触试剂盒里的任何成份。

4   Elisa 试剂盒请远离儿童

自备物品：

1 、 37 ℃ 恒温箱

2 、 标准规格酶标仪

3 、 精密移液器及一次性吸头

4 、 蒸馏水

5 、 一次性试管

6 、 吸水纸

保存条件及有效期：

1 ．试剂盒保存：； 2-8 ℃ 。

2 ．有效期： 6 个月

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